在这部铁鹰行动动作/犯罪片中,90年代初期，一批自称“东北虎”、“西北狼”的不法分子，打着“南下支队”的旗号，在我国绵和的铁路客运线上行凶作恶。这批凶残狡猾的车匪路霸，作案突发性极强，借助现代化交通工具，逃离现场快，危害极大。其头目二盖子（高发饰），绰号“东北虎”，不仅心狠手辣，更善于化妆各种人物，属于高智商犯罪。
歹徒的猖狂，引起我公安部、铁道部公安局的极大重视。为了维护共和国法律的尊严、保护广大旅客的生命财产安全，由铁道部公安局副局长李威（陈剑飞饰）亲自挂帅，率领铁路公安系统其余四位“五虎上将””——神枪手“枪神”、擅玩飞刀的“刀子”、防爆专家“闷雷”、公安散打女冠军“刺梅”，组成“铁鹰刑警队”，而领导对其成员唯一的要求，就是“不能挂彩、伤残，谁挂彩，谁离队”。铁鹰已经张开翅膀……
